Normalna mikroflora človeškega telesa in njegove funkcije

Parietalna mikroflora črevesja kolonizira sluznico v obliki mikrokolonij, ki tvorijo poseben biološki film, ki sestoji iz mikrobnih teles in eksopolno-saharidne matrice. Eksopolisaharidi mikroorganizmov, imenovani glikokaliks, ščitijo mikrobne celice pred različnimi fizikalno-kemijskimi in biološkimi učinki. Tudi črevesna sluznica je zaščitena z biološkim filmom.

Najpomembnejša funkcija normalne črevesne mikroflore je njena udeležba v kolonizacijski odpornosti, ki jo razumemo kot kombinacijo zaščitnih dejavnikov telesa in konkurenčnih, antagonističnih in drugih značilnosti črevesnih anaerobov, ki zagotavljajo stabilnost mikroflore in tujih mikroorganizmov, ki preprečujejo kolonizacijo sluznice.

Normalna vaginalna mikroflora vključuje bakterioide, laktobacile, peptostreptokokke in klostridije.

Predstavniki normalne mikroflore, medtem ko zmanjšujejo odpornost na telo, lahko povzročijo gnojne vnetne procese, tj. normalna mikroflora je lahko vir avtoinfekcije ali endogene okužbe. Prav tako je vir genov, kot so geni za odpornost na antibiotike.

Parietalna mikroflora je

Različne neinfekcijske vnetne črevesne bolezni in "funkcionalne" motnje (sindrom iritabilnega črevesa) pogosto spremljajo spremembe v mikroekološki homeostazi. V sedanji fazi razvoja domače gastroenterologije se problem črevesne disbiocenoze ocenjuje iz novih perspektiv (Sheptulin AA, 1999).

Številni članki razpravljajo o tem vprašanju o vlogi črevesne mikroflore pri zagotavljanju normalnega delovanja telesa, kot tudi o mikrobioloških vidikih diagnosticiranja motenj biocenoze (B. Shenderov, 1998, V. Bondarenko, 1998, V. G. Rumyantsev, G.999, Korneva T..K., 1999, Z. Zimmerman, 2000)

Črevesna mikroflora je funkcionalno razdeljena v dve glavni skupini: parietalni in luminalni. Razsvetljena ali prehodna mikroflora je del fekalne mikroflore. Njegovi glavni predstavniki so aerobni in neobvezni aerobni mikroorganizmi, predvsem člani družine Enterobacteriaceae.

Sestava svetlobne mikroflore ni konstantna in se spreminja glede na naravo prehrane, kakovost hrane, funkcionalno stanje črevesja, pogostost blata. V zvezi s tem, bakteriološki pregled fekalne mikroflore po standardni metodi (Metodska priporočila Ministrstva za zdravje ZSSR št. 10-11 / 31 z dne 04.14.1986 g) je študija tistega dela bakterijskega spektra, ki bodisi ne obstaja več ali ne bo v bližnji prihodnosti.

Ta okoliščina je najpomembnejša pri interpretaciji rezultatov bakteriološkega sejanja iztrebkov pri tako imenovanih "funkcionalnih" boleznih črevesja. Zlasti pri sindromu razdražljivega črevesa pri driski je stalno "izpiranje" luminalne mikroflore in je skoraj nemogoče zanesljivo oceniti nekatere njegove konstantnosti in s tem patološke učinke na sluznico.

Parialna mikroflora predstavlja 99% anaerobnih in opcijsko anaerobnih bakterij (bifidobakterij in laktobacilov, bacteroidov, streptokokov mlečne kisline itd.). Predstavniki normalne mikroflore so pritrjeni na površinske receptorje epitelijskih celic. Je bolj stabilen, je stabilen sistem, ki ga je težko uničiti.

Glede na to, da je kolonizacija saprofitskih populacij v debelem črevesu drugačna tudi v normalnih pogojih (Michelsaar ME, 1990), in prehodna mikroflora dominira v fekalnih vsebinah, kot tudi težave bakteriološke ocene spektra parietalne črevesne mikroflore, je zelo napačno presoditi spremembe v mikrobna koenoza le z bakteriološko preiskavo iztrebkov.

V zvezi s tem je pomembno natančno oceniti parietalno mikrofloro debelega črevesa. To se lahko izvede tako bakteriološko, s sejanjem kolonobioptanov na hranilnem gojišču, kot tudi s histobakterioskopskim pregledom s svetlobno mikroskopijo preparatov, obarvanih s posebno tehniko.

Histobakterioskopska metoda je bila široko uporabljena v delih A.V. Zinserling in njegova šola pri študiju nalezljivih bolezni. Zaznavanje mikroorganizmov se lahko izvede tako v razmazih kot v histoloških delih. Njihovo število, kakor tudi struktura tkivnih celic se lahko odkrije z različnimi metodami obarvanja (Zinserling AV, 1993).

Težave, ki izhajajo iz te metode raziskovanja, so povezane s povsem tehničnimi problemi - pranje površinske plasti sluzi z mikroorganizmi, ki se nahajajo v njem med predelavo biopsijskega materiala, zaradi česar je ocena mikroflore nemogoča ali neuporabna.

Za diagnosticiranje Helicobacter pylori (Morozov IA, 1997, 1999) so razvili metode fiksacije, ki omogočajo stabilizacijo stenske plasti sluznice biopsije. Predlagana je metoda pokrivanja površine biopsije s plastjo agarskega gela, da se prepreči izpiranje parietalne sluzi pri objavljanju materiala za oceno stopnje kontaminacije in razmerja bakterij s površino želodčne sluznice.

Ta tehnika se uporablja za ohranitev supraepitelne sluzi v kolonobioptatih. Predhodno potopitev koščka sluznice v 1-odstotni agar gel, ki se segreje v mikrovalovni pečici, pripravljeni na sterilnem fosfatnem pufru pH 7,2-7,4, vam omogoča, da v njej pritrdite sluz z mikroorganizmi in jo shranite z nadaljnjim odlaganjem in obarvanjem biopsije. Agarjev sloj gela v določeni meri ustvarja anaerobne pogoje za mikroorganizme med dostavo materiala v bakteriološki laboratorij.

Za bakteriološko inokulacijo smo uporabili homogeniziran bioptedni fragment sluznice kolona v 0,1 ml izotonične raztopine natrijevega klorida. V prvi fazi študije je bil namenjen le oceni sestave aerobne populacije mikroorganizmov. Računovodstvo je bilo izvedeno v enotah, ki tvorijo kolonije (CFU) na trdnih hranilnih medijih v smislu 1 ml substrata, sledila je biokemijska in serološka identifikacija predstavnikov družine Enterobacteriaceae in drugih pogojno patogenih bakterij.

Z izvedbo histobakterioskopske študije smo s pomočjo kvantitativne metode po analogiji z določitvijo stopnje kontaminacije H. pylori v gastrobiopsiji ocenili število mikroorganizmov v parietalni sluzi kolonobiopsije. šibka stopnja diseminacije - do 20 mikrobioloških teles, povprečno 20-50 mikrobnih teles, močno - več kot 50 mikrobioloških teles v vidnem polju s povečanjem x900 (oljno potopitev).

Kot model za proučevanje parietalne mikroflore kolona so bili izbrani kolonobioptati bolnikov z diagnozo sindroma razdražljivega črevesa, pri katerih so bili opravljeni kolonoskopija in biopsija, da se izključi tumorski proces, vnetna črevesna bolezen ipd. Ti predmeti so lahko pogojna norma (nespremenjena sluznica).

Pregledali smo 70 bolnikov, starih od 15 do 50 let. Proučenih je bilo 210 kolonobioptatov, pridobljenih s fibrokolonoskopijo od slepega, prečnega debelega črevesa in sigmoidnega kolona. V 30 vzorcih biopsije se je plast parietalne sluzi zdela desquami. Hkrati pa histobakterioskopska slika ni bila preverjena. V 180 pripravkih se je ohranila parietalna plast sluzi, ki je omogočila histobakterioskopski pregled.

V biopsijskih vzorcih sluznice slepega črevesa (51 vzorcev) v študiji histobakterioskopske metode je bila v 28 primerih ugotovljena visoka stopnja kontaminacije. Flora je bila predstavljena s gram-pozitivnimi tankimi palicami, razporejenimi v kratke verige ali vzporedno (verjetno laktobacili) in po videzu pleomorfne (verjetno bifidobakterije).

Gram-negativne pleomorfne palice (verjetno bakterioide) so bile opažene v skoraj enakih razmerjih s gram-pozitivnimi predstavniki mikroorganizmov. Gram-pozitivne majhne koke, locirane posamično, so bile odkrite v majhni količini. Skupaj z njimi je bila šibka stopnja diseminacije z majhnimi gram-negativnimi ravnimi palicami, lociranimi ločeno ali v parih (domnevno mikroorganizmi iz družine enterobakterij).

V 20 vzorcih smo v zmernih količinah določili zgoraj opisane gram-pozitivne in gram-negativne palice, morfološko podobne lakto-in bifidobakterijam in bacteroidom, v manjši količini pa tudi gram-negativne palice, morfološko podobne enterobakterijam. Le v 4 primerih so gram-negativni bacili družine enterobakterij povzročili visoko stopnjo osemenitve s šibko stopnjo kolonizacije sluznice s predstavniki normalne mikroflore.

Bakteriološko sejanje vzorca za biopsijo slepiča je pokazalo povečanje celotnih sevov bakterije E. coli. V 9 vzorcih biopsije je bila posejana E. coli z zmanjšano encimsko aktivnostjo in 4 E. coli s hemolitično sposobnostjo, v 1 primeru je bila identificirana detoksikacija Klebsiella kulture.

S histobakterioskopsko študijo vzorcev biopsije sluznice prečnega debelega črevesa je bilo mogoče ugotoviti visoko stopnjo diseminacije s gram-pozitivnimi in gram-negativnimi palicami (predstavniki normalne mikroflore) v 16 primerih. Istočasno so predstavniki družine enterobakterij povzročili šibko kolonizacijo.

V večini primerov (42 kolonobioptatov) so bakterije, ki so morfološko podobne mikroorganizmom normalne mikroflore, opazili v zmernih količinah, in predstavniki enterobakterij in gram-pozitivnih majhnih kokov v majhnih verigah (enterokoki) so bili prisotni v enakih deležih.

V 6 kolonobioptatih smo opazili visoko stopnjo diseminacije s gram-negativnimi majhnimi ravnimi palicami z majhnim številom gram-pozitivnih kokov, ki se nahajajo tako v verigah (enterokoki) kot v grozdih (stafilokoki). Saprofiti v teh vzorcih biopsije so bili prisotni le v majhnih količinah.

Bakteriološko so bili pretežno posejani predstavniki normalne Escherichia coli. Skupaj z njimi je v 10 primerih identificiran E. coli z zmanjšanimi encimskimi lastnostmi, pa tudi hemolitični sevi. V 7 primerih so bili posejani predstavniki pogojno patogene mikroflore (Klebsiella, citrobacter, Staphylococcus aureus).

V steni vzorcev sluz biopsijo je sigmasto razmerje mikroorganizmi, kot sledi: od 65 biopsij z visoko stopnjo kontaminacije normalne mikroflore z nizko stopnjo kolonizacijo z mikroorganizmi iz družine Enterobacteriaceae je bilo ugotovljeno v 15 primerih, zmerno stopnjo kontaminacije grampozitivnim palic z majhno količino Gramu negativnih bakterij in po Gramu pozitivni koki 32 biopsije pri V 18 vzorcih so člani družine enterobakterij prevladali nad anaerobnimi mikroorganizmi.

Njihovo število je bilo ocenjeno kot visoka in nizka stopnja diseminacije. Poleg tega je bilo v 13 vzorcih biopsije veliko število gram pozitivnih stafilokokov, v dveh primerih pa so bile opažene glivične celice, podobne kvasu. V bakterioloških rastlinah v enakih deležih so bile deformacijske palice z zmanjšano encimsko aktivnostjo, hemolitični sevi in ​​predstavniki normalne Escherichia coli. Pogosto patogena mikroflora je bila posejana v 13 primerih.

Ko vzporedno bakteriološko preiskavo fekalne mikroflore po standardni metodi pri 43 ljudi, stanje črevesne mikrobiocenoze je bilo obravnavano kot dysbacteriosis 2-4 stopinj. Vendar pa je med histobakterioskopskim pregledom le 18 bolnikov pokazalo kršitve sestave parietalne mikroflore, ki je vključevala zmanjšanje števila predstavnikov normalne mikroflore in kolonizacijo parietalne plasti sluzi predvsem s pogojno patogeno bakterijo.

Bakteriološka študija kolonobioptata ni brez enakih negativnih vidikov kot študija iztrebkov, čeprav v manjši meri. Glavne metodološke težave vključujejo pomanjkanje selektivnih metod za izolacijo in anaerobno gojenje nesalabilnih anaerobnih bakterij. Na primer, v debelem črevesu je število neekulturnih anaerobnih bakterij 10 do 10 stopinj - 10 do 11 stopinj mt na 1 g vsebine (Shenderov BA, 1998).

Druga negativna točka je pomanjkanje pripravljenih priporočil za kvantitativno oceno gojenih mikroorganizmov, norme niso izračunane. Kljub tem težavam se zdi, da je bakteriološko sejanje kolonobioptata s plastjo naravne sluzi, kolonizirano s parietalno, saprofitsko mikrofloro, bolj reprezentativna študija v smislu ocenjevanja stanja mikrobiocenozije debelega črevesa kot sejanja blata z oceno prehodne mikroflore.

Črevesna mikroflora se je razvila v procesu človeške evolucije, je rezultat različnih prilagoditev, prilagajanja mikroorganizma na habitat v makroorganizmu (VN Krasnogolovets, 1989).

Glavni energetski proces za anaerobno skupino mikroorganizmov skoraj stenske flore je evolucijsko najstarejši mehanizem - fermentacija, ki se pojavi brez kisika. Organska snov je donor in akceptor elektronov. Kisik za te bakterije je bodisi strupen ali ravnodušen. Struktura črevesne sluznice s svojimi resicami, kriptami, plastjo sluzi, ki jo proizvajajo vrčaste celice, je idealno mesto za ustvarjanje anaerobioznih stanj

Normalna mikroflora, ki kolonizira črevesno sluznico, je evolucijsko starejša in zavzema nišo. Ena od glavnih funkcij parietalne mikroflore je zagotoviti kolonizacijsko odpornost zaradi izražanja različnih antagonistično aktivnih, antibiotik podobnih snovi, organskih kislin, vodikovega peroksida, lizozima, kolicinov, receptorskih blokatorjev itd., Ki preprečujejo adhezijo patogenih in pogojno patogenih mikroorganizmov do enterocitov.

Znana je tudi še ena pomembna funkcija Saprofitske mikroflore - imunomodulatorji povezana z Gram-pozitivne bakterije proizvajajo muramil dipeptida, ki ima pozitivno vplivati ​​na fagocitov in z vplivom O-antigen gram-negativne bakterije o sintezi imunskih celic izločujoče imunoglobuline, citokine in interferon (A. Bondarenko s et al., 1998).

Intestinalna parijetalna sluz, sekretorni imunoglobulini in saprofitska flora skupaj tvorijo predepitelijsko zaščito, ki zavzema vdolbine in zvišanja, ki jih tvorijo enterociti. Slučajni patogeni mikroorganizmi, ki vstopajo v črevesni lumen ali pogojno patogene bakterije, ki živijo v njem, proizvajajo različne endo- in eksotoksine.

Pot do toksinov v njihove specifične receptorje blokira mukozno pregrado iz biofilma. Ob ugodnih pogojih za množično razmnoževanje patogenov obstaja realna možnost, da izrazijo svoje patogene lastnosti zaradi adhezije na epitelne celice s kasnejšo kolonizacijo sluznice.

Glavni vir energije za aerobne mikroorganizme luminalne flore je oksidativna fosforilacija. Elektronski darovalci so organske spojine biološkega izvora, ki so optimalno v lumenu črevesja.

Neželeni okoljski dejavniki, prehranske motnje, neracionalna uporaba antibiotikov, hormonska terapija in drugi negativni učinki, ki oslabijo nespecifično in specifično odpornost makroorganizma, prispevajo k nastanku kroničnega vnetnega procesa in hkratni disbakteriozi v prebavnem traktu.

Zaradi možnosti stika z enterociti (kolonociti) v krajih "preboj" patogeni mikroorganizem sproži izločanje tipa 3 (odvisen od stika) - glavni molekularni mehanizem preživetja in razmnoževanja v gostiteljskem organizmu, skupnega različnim bakterijam (Musser J M, 1996). Ta mehanizem je odgovoren za transport efektorskih molekul iz citoplazme na površino bakterij, kjer pri stiku povzročajo modifikacijo celičnih proteinov. Takšne efektorske molekule so bile najdene v Yersinia, S flexneri, E coli (Ryapis LA, Lipnitsky AV, 1998).

Ko je sluznica, ki vsebuje IgA, poškodovana, pride do degranulacije vrčastih celic z uničenjem saprofitske flore (Droy M.T. 1985). Tako se biofilm normalne mikroflore nadomesti z biofilmom pogojno patogenih ali patogenih mikroorganizmov. Pod določenimi pogoji lahko pogojno patogene bakterije postanejo bolj konkurenčne za mesta adhezije kot bifidobakterije in laktobacili, in ker so njihove povezave s celicami izjemno močne, je mogoče tvoriti vir endogene okužbe.

Uporaba histobakterioskopske metode raziskovanja, skupaj z morfološko oceno biopsije colvnio, omogoča oceno sestave mikroflore sten, ki odraža objektivno sliko stanja mikrobiocenoze, saj se na tem področju mikroorganizem dotika mesta kolonije. Ta metoda, skupaj z bakteriološko inokulacijo biopsijskega materiala, se lahko uporabi za indikativno značilnost kvalitativne sestave parietalne mikroflore debelega črevesa v kompleksnih kliničnih in laboratorijskih preiskavah bolnikov s črevesno disfunkcijo.

Literatura

1. Bondarenko A.V., Bondarenko V.M., Bondarenko V.M. Načini za izboljšanje etiopatogenetske terapije disbakterioze. // Časopis mikrobiol. -1998. - № 5. - P. 96 -101.

2. Dysbacterioses v prebavnem traktu / V.M. Bondarenko, B.V. Boev, E.A. Lykov et al. // Ros. gastroenterol., hepatol, koloprokt. -1998. - Ne. 1.-C.61 - 63.

3. Koreneva TK Intestinalna disbakterioza pri proktoloških bolnikih z mikrobiološkimi vidiki. // Ros. Journal gastroenterol, hepatol, col. - 1999. - № 3 -С. 55-60.

4. Krasnogalovets V.D. Črevesna disbioza. - M.: Medicine, 1989. - 208 str.

5. Muselsaar M.E. Nastanek in ohranjanje odporne mikroflore prebavil. // Zbornik VNIIA. - M., 1990. - Požar 19 - C 26

6. Morozov I.A. Morfološki vidiki okužbe s HP-jem v želodcu // Peto zasedanje Ruske skupine za preučevanje Helicobacter pylori. Gradivo za sejo. - Omsk, 1997. -C. 62-66 7 Morozov I.A. Problemi morfološke diagnoze pilona Helicobacter v želodcu. // Ros. časopisov gastroenterol hepatol; Koloprokt - 1999 - №2. -C. 46 - 48.

8. Uporaba bakterijskih bioloških pripravkov v praksi zdravljenja bolnikov s črevesnimi okužbami. Diagnoza in zdravljenje črevesne disbioze: Metoda, priporočila / Ministrstvo za zdravje ZSSR. - M, 1986 - 23 s

9. Rumyantsev V.G. Črevesna disbakterioza, klinični pomen in načela zdravljenja. // Ros zhurn. gastroenterol., hepatol, koloprokt - 1999 -№3-C. 61 - 63.

10. Ryapis LA, Lipnitsky A. stoletje Mikrobiološki in populacijsko-genetski vidiki patogenosti bakterij // Žurn mikrobiol -1998. - № 6. -1 109-113

11 Zinserling A.V. Sodobne okužbe. Problematika patološke anatomije in patogeneze. Priročnik. - SPb. Sothis - 1993 - 363

12. Zimmerman Ya.S. "Zahodnoevropejci" in njihovo mesto v sodobni ruski medicinski terminologiji, drugi sporni terminološki problemi // Klin. zdravila - 2000 - №1 - С 59 - 62

13 Shenderov B.A. Normalna mikroflora in njena vloga pri ohranjanju zdravja ljudi. // Časopis Ros. gastroenterol, hepatol, koloprokt - 1998 - št. 61-65.

14. Sheptulin A.A. Sindrom prekomernega rasti bakterij in "črevesna dysbiosis": njihovo mesto v sodobni gastroenterologiji. // Ros. Dnevnik gastroenterol., Hepatol, koloprokt. - 1999. - № 3 - S 51 - 55

Mikroflora zraka

Zrak kot habitat je manj ugoden kot zemlja in voda - nekaj hranil, sončna svetloba, sušenje. Glavni vir onesnaževanja zraka z mikroorganizmi je zemlja, manj vode. Vrste prevladujejo med koki (vključno s sarcinom), bakterijami spore, glivami, aktinomicetami. Posebej pomembna je mikroflora zaprtih prostorov (nabira se ob sprostitvi skozi dihalni trakt osebe). Številne okužbe dihal (gripa, oslovski kašelj, davica, ošpice, tuberkuloza itd.) Se širijo skozi kapljice v zraku (zaradi nastajanja obstojnih aerosolov).

Mikrobiološka čistost zraka je v bolnišnici zelo pomembna (posebne operacije in drugi kirurški oddelki).

Človeška mikroflora in njena vrednost

Otrok se v materinem telesu razvije v normalnih pogojih v sterilnih pogojih. Vzpostavitev novega ekološkega sistema »človeški organizem + mikroflora, ki ga naseljuje« se začne v trenutku rojstva, njegova osnova pa je mikroflora matere in okolje, ki obdaja otroka (predvsem zrak). V kratkem času kožo in sluznice, ki komunicirajo z zunanjim okoljem, naseljujejo različni mikroorganizmi. Pri nastajanju mikroflore dojenčkov prvega leta (predvsem bifidobakterij in laktobacilov) je bistvena naravna prehrana (dojenje).

Normalna (tj. V zdravem telesu) mikroflora je kvantitativno in kvalitativno predstavljena na različnih delih telesa (ekotopi) drugače. Razlogi so neenaki habitatni pogoji.

Avtohtono (tj. Neločljivo povezano) mikrofloro lahko razdelimo na rezidenčno (stalno) in prehodno (nestalno). Na sluznicah, še posebej v prebavnem traktu, predstavniki normalne mikroflore živijo v obliki dveh oblik - nekatere se nahajajo v luminu (luminalna), druga pa je zaprta v sluznico parietalne matrice, ki tvori biofilm (parietalna mikroflora) in je povezana s kolonizacijsko odpornostjo črevesja - naravna ovira za zaščito črevesja (in telesa kot celote) od povzročiteljev infekcij.

Normalna mikroflora kože.

Najbolj poseljeni so mikroorganizmi, ki so zaščiteni pred svetlobo in sušenjem. Sestava mikroflore je najbolj konstantna na območju odprtin mešičkov oljnih las. Staphylococcus epidermidis in S.saprophyticus, glivice rodu Candida ter redkeje dipteroide in mikrokoke so pogosteje zaznane.

Mikroflora dihalnih poti

Sluznice v žrelu, sapniku, bronhih in alveolah zdrave osebe ne vsebujejo mikroorganizmov. Največji del mikroflore roto- in nazofarinksa povzroča ozelenitev streptokokov, redkeje se odkrijejo neisseries, difteroidi in stafilokoki.

Mikroflora genitourinarnega trakta

Mikrobna biocenoza je slaba, zgornji deli so običajno sterilni. V vagini zdrave ženske prevladujejo mlečne palice Doderleina (laktobacili), ki ustvarjajo kisli pH, ki zavira rast gram-negativnih bakterij in stafilokokov ter dipteroide. Obstaja ravnovesje med laktobacili na eni strani in gardnerello in anaerobi na drugi strani.

Mikroflora prebavnega trakta

Najbolj aktivne bakterije se usedejo v prebavila. Hkrati se kolonizacija izvaja jasno »po etažah«. V želodcu z kislo reakcijo okolja in zgornjih delov tankega črevesa število mikroorganizmov ne presega 1000 na ml, pogosteje so najdeni laktobacili, enterokoki, kvas, bifidobakterije, E. coli.

Mikroflora debelega črevesa je najbolj stabilna in raznolika. To je resnično rezervoar bakterij celotnega organizma, ugotovljeno je bilo več kot 250 vrst, skupna biomasa mikrobov lahko doseže 1,5 kg. Prevladujoča skupina v normi so nesporne anaerobne bakterije (bifidobakterije in bakterioidi) - do 99%. Dodelite mukozno (parietalno) in luminalno mikrofloro. Parietalna mikroflora zagotavlja kolonizacijsko odpornost črevesja, ki igra pomembno vlogo pri preprečevanju (normalnem) in razvoju (s patologijo) eksogenih in endogenih nalezljivih bolezni.

Normalna mikroflora in zlasti mikroflora debelega črevesa ima pomemben vpliv na telo. Njegove glavne funkcije:

  • - zaščitni (antagonizem do drugih, vključno s patogenimi mikrobi);
  • - imunostimulacijo (antigeni mikroorganizmov spodbujajo razvoj limfoidnega tkiva);
  • - prebavni (predvsem izmenjava holesterola in žolčnih kislin);
  • - presnovne (sinteza B-B1,2,6,12 skupine vitaminov, K, nikotinske, pantotenske, folne kisline).

Obstajajo različne metode za preučevanje vloge normalne mikroflore. Gnotobionti (živali brez mikroorganizmov) se uporabljajo za preučevanje vloge mikroorganizmov za delovanje fizioloških sistemov. Gnotobiološke tehnologije se uporabljajo za zdravljenje imunske pomanjkljivosti, opeklin.

Zaradi različnih učinkov, ki zmanjšujejo naravno odpornost, se pri hudih nalezljivih in somatskih boleznih pojavijo disbakterioze, zlasti z neracionalno uporabo antibiotikov. Dysbacteriosis - spremembe v kvantitativni in kvalitativni sestavi mikroflore, predvsem črevesja. Pogosteje spremlja povečanje fakultativne anaerobne ali preostale mikroflore (gram-negativne bacile - Escherichia coli, Proteus, pseudomonade), stafilokoki, glivice Candida. Ti mikroorganizmi so na splošno odporni na antibiotike, in ko se normalna flora zatre z antibiotiki in zmanjša naravna odpornost, se lahko nemoteno razmnožujejo.

Najhujše oblike disbakterioze so stafilokokna pljučnica, kolitis in sepsa, kandidomikoza, psevdomembranski kolitis, ki ga povzroča Clostridium difficile.

Parietalna mikroflora je

Kaj je normalna mikroflora? S splošnega biološkega stališča pomeni celotno biocenozo - v tem primeru mikrobne skupnosti, ki naseljujejo biotope (Biotop (»kraj življenja«)) - to velja za mikroekologijo, to je del sluznice, kože ali organa makroorganizma z enako vrsto obstoja za svoje mikroorganizme (približno Ed. )) odprte votline gostitelja. Optimalno "mesto življenja" za mikroorganizme lahko služi kot ustna votlina, nazofarinks, požiralnik, želodec, majhno in veliko črevo, sečnica itd. Tak biotop, skupaj z biocenozo, tvori ekosistem dihalnega, gastrointestinalnega ali urogenitalnega trakta.
Po obsežni definiciji akademika Ruske akademije medicinskih znanosti Anatolija Vorobjeva (1923–2006) je normalna mikroflora kvalitativno in kvantitativno razmerje med različnimi mikrobnimi populacijami posameznih organov in sistemov, ki ohranja biokemično, presnovno in imunološko ravnovesje telesa, ki je potrebno za vzdrževanje zdravja ljudi.

Opozoriti je treba, da so vsi mikroorganizmi, ki živijo v določenem biotopu, med seboj v kompleksnih simbiotičnih odnosih, povezani s trofičnimi (prehranskimi) verigami. Tako se ekosistemi sluznice odprtih votlin in kože oblikujejo od trenutka rojstva otroka in se spreminjajo v procesu njegove rasti in razvoja. Nasledstvo, tj. zaporedna sprememba na določenem območju habitata nekaterih biocenoz pri drugih, praviloma se konča z oblikovanjem stabilne in stabilne mikrobne skupnosti.

IZBOLJŠANJE MIKROEKOLOGIJE: DISBAKTERIOZA

10) ureja sistem njihovega skupnega vedenja, imenovanega QS (Quorum Sensing). Takšen »občutek zbora« je bil prvič opisan v študiji luminiscenčnega mehanizma morskih bakterij. Kot se je izkazalo, regulatorni signali, ki se prenašajo iz celice v celico, jim omogočajo, da uskladijo svoja dejanja, ob pravem času pa te na videz elementarne skupnosti spremenijo v večcelični organizem z milijoni kopij. Kot je podrobno razložil akademik Ruske akademije medicinskih znanosti, direktor našega inštituta Alexander Gunzburg, tip QS ureja širok spekter fizioloških procesov, vključno z bioluminiscenco, tvorbo biofilmov, sintezo izločenih patogenih faktorjev in antibiotikov, prenos konjugativne plazme in celo replikacijo. Oblikovanje biofilma s pogojno patogenih bakterijami in glivami podobnimi kvasovkam rodu Candida z rastjo na gostem hranilnem mediju je pokazala Oksana Rybalchenko.
Pri črevesni disbakteriozi lahko prehodne bakterije mikroflore vstopijo v citoplazmo enterocitov, ki se štejejo kot manifestacija endocitoze - zajetje majhnih delcev, tekočin in makromolekul v celici makroorganizma. Mimogrede, med pogojno patogene bakterije (Staphylococcus aureus, hemolitični E. coli, Klebsiella, itd.) In Candida glivice se pojavljajo sevi, ki sintetizirajo snovi, ki uničujejo laktobacile, ki so jih najprej odkrili zaposleni v Inštitutu za visoko čiste biologije (St. Petersburg) in na Inštitutu za epidemiologijo in mikrobiologijo. jim. N.F. Gamaley.
Klinične manifestacije disbioze so označene z znaki, ki niso značilni za glavno bolezen. Najpogosteje se zmanjša kolonizacijska odpornost, zavira delovanje imunskega sistema s povečano dovzetnostjo za okužbe. Široka razširjenost teh bolezni večina domačih avtorjev upravičeno obravnava enega najpomembnejših dejavnikov, ki določajo trenutno povečanje pogostosti in resnosti akutnih in kroničnih bolezni prebavnega, dihalnega in urogenitalnega trakta. (Slika: Endocitoza gram-negativnih bakterij v črevesni disbiozi - faze ujetja enterobakterij s strani evkariontske celice).

Mikroflora človeškega telesa

Mikroflora človeškega telesa je evolucijsko uveljavljena kvalitativno in kvantitativno relativno stalna zbirka mikroorganizmov, vseh biocenoz in posameznih biotopov telesa.

Otrok je rojen sterilen, vendar še vedno prehaja skozi rojstni kanal, ujame spremljajočo mikrofloro. Nastajanje mikroflore poteka kot posledica stika novorojenčka z okoljskimi mikroorganizmi in mikroflore materinega telesa. Do starosti 1-3 mesecev postane mikroflora otroka podobna mikroflori odrasle osebe.

Število mikroorganizmov odraslega je 10 na 14 posameznikov.

1. Na 1 cm2 kože je lahko več sto tisoč bakterij

2. Pri vsakem vdihu se absorbira 1500–14000 ali več mikrobnih celic.

3. V 1 ml sline - do 100 milijonov bakterij

4. Skupna biomasa mikroorganizmov v debelem črevesu je približno 1,5 kg.

Vrste mikroflore telesa

Rezidenčna mikroflora - stalna, avtohtona, avtohtona

Prehodna - nestalna, alohtonična

Kolonizacijska odpornost je normalna mikroflora, ki preprečuje kolonizacijo biotopov telesa s strani neznancev patogeni mikroorganizmi.

Prebava in razstrupljanje eksogenih substratov in metabolitov

Sinteza vitaminov, aminokislin, beljakovin

Sodelovanje pri izmenjavi žolčnih kislin, sečne kisline, lipidov, ogljikovih hidratov, steroidov

Negativna vloga mikroflore

Pogojno patogeni predstavniki normalne mikroflore so lahko vir endogene okužbe. Običajno ti mikroorganizmi ne povzročajo težav in z oslabljenim imunskim sistemom, kot je stafilakok - lahko povzroči gnojno okužbo. E. coli - v črevesju, in če se izkaže v mehurju - cistitis, in če pride v rano - gnojna okužba.

Pod vplivom mikroflore se lahko poveča izločanje histamina - alergijska stanja

Normoflora je skladišče in vir plazmidov za protimikrobno odpornost.

Glavni biotopi telesa -

Naseljena habitata - v teh biotopih bakterije živijo, množijo se in opravljajo določene funkcije.

Sterilni biotopi - bakterije so običajno odsotne v teh biotopih, izolacija bakterij iz njih ima diagnostično vrednost.

Zunanje genitalije, sečnica

Zunanji slušni kanal

Sterilni biotopi - kri, cerebrospinalna tekočina, limfa, peritonealna tekočina, plevralna tekočina, urin v ledvicah, ureterji in mehur, sinovialna tekočina.

Kožna mikroflora - epidermalni in saprofitni stafilokoki., Glivice, podobne kvasu, difterioidi, mikrokoki.

Mikroflora zgornjih dihal - streptokoki, dipteroidi, Neisseria, Staphylococcus.

Oralna votlina - stafilokoki, streptokoki, glivice podobne kvasovkam, bakterije lakto, bacteroide, neisserii, spirohete itd.

Eophagus - običajno ne vsebuje mikroorganizmov.

V želodčnem okolju - izjemno neprijetno - laktobacili, kvas, posamezni stafilokoki in streptokoki

Črevesje - koncentracija mikroorganizmov, njihova sestava vrst in razmerje se razlikuje glede na delce črevesja.

Pri zdravih ljudeh v dvanajstniku število bakterij ne presega 10 do 4 do 10 do 5 kolonij, ki tvorijo kolonije (sočasno) na ml.

Sestava vrst - laktobacili, bifidobakterije, bakterioidi, enetrocoki, glivice, podobne kvasu itd. Pri vnosu hrane se lahko število bakterij znatno poveča, vendar se v kratkem času vrne na prvotno raven.

V zgornjem tankem črevesu je število mikroorganizmov 10 do 4 do 10 do 5 kolonizacijskih enot na ml, v ileumu do 10 do 8. stopnje.

Mehanizmi, ki preprečujejo mikrobno rast v tankem črevesu.

Antibakterijsko delovanje žolča

Sluz, ki vsebuje inhibitorje mikrobne rasti

V primeru kršitve teh mehanizmov se povečuje mikrobno sejanje tankega črevesa, t.j. prekomerno rast bakterij v tankem črevesu.

V debelem črevesu pri zdravi osebi je število mikroorganizmov od 10 do 11 do 10 do 12 ko.e na leto Anaerobne vrste bakterij prevladujejo - 90-95% celotne sestave. To so bifidobakterije, bacteroide, bakterije laktoze, veylonella, peptostreptokokki, klostridije.

Približno 5-10% - fakultativni anaerobi - in aerobi - E. coli, enterobakterije negativne laktoze, enterokoki, stafilokoki, glivice podobne kvasu.

Vrste črevesne mikroflore

Pristenochnaya - konstanta v sestavi, opravlja funkcijo kolonizacijskega upora

Razsvetljenje - manj stalna v sestavi, opravlja encimske in imunizacijske funkcije.

Bifidobaktrija so najpomembnejši predstavniki obveznih bakterij v črevesju. To so anaerobi, ki ne tvorijo spore, so gram-pozitivne palice, konci so razcepljeni in imajo lahko sferične otekline. Večina bifidobakterij se nahaja v debelem črevesu, saj je njegova glavna stena in svetlobna mikroflora. Vsebnost bifidobakterij pri odraslih je v 10. do 10. letu 10. v 10. stoletju. na mesto

Laktobacili so še en predstavnik obvezne mikroflore prebavil in je laktobacil. To so gram pozitivne palice, z izrazitim polimorfizmom, razporejenim v verige ali eno za drugo, ne tvorijo spore. Lactoflora najdemo v mleku ljudi in živali. Lactobacillus (laktobacili). Vsebina v debelem črevesu je 10 v 6. - 10 v 8. kil. na mesto

Reprezentativna obvezna mikroflora črevesja je escherichia (Escherichia collie) - E. coli. Vsebnost črevesnih paličic je v sedmem - 10 - ih v osmih stopnjah so 10. na mesto

Eobioz - mikroflora - normalna flora. Biološko ravnovesje normalne flore zlahka motijo ​​eksogeni in endogeni naravni dejavniki.

Dysbacteriosis - spremembe v kvalitativni in kvantitativni sestavi mikroflore in njenih običajnih habitatov.

Črevesna disbakterioza je klinični in laboratorijski sindrom, ki je povezan s spremembami v kvalitativni in / ali kvantitativni sestavi črevesne mikroflore, s posledičnim nastankom presnovnih in imunoloških motenj z možnim razvojem prebavnih motenj.

Datum dodajanja: 2016-01-30; Ogledi: 463; DELOVANJE PISANJA NAROČILA

Mikroflora človeškega telesa (avto mikroflora)

Mikroflora človeškega telesa (avto mikroflora)

- je evolucijsko vzpostavljen kvalitativno in kvantitativno relativno stalen agregat mikroorganizmov, vseh biocenoz in posameznih biotopov telesa.

Otrok je rojen sterilen, vendar še vedno prehaja skozi rojstni kanal, ujame spremljajočo mikrofloro. Nastajanje mikroflore poteka kot posledica stika novorojenčka z okoljskimi mikroorganizmi in mikroflore materinega telesa. Do starosti 1-3 mesecev postane mikroflora otroka podobna mikroflori odrasle osebe.

Število mikroorganizmov odraslega je 10 na 14 posameznikov.

1. Na 1 cm2 kože je lahko več sto tisoč bakterij

2. Pri vsakem vdihu se absorbira 1500–14000 ali več mikrobnih celic.

3. V 1 ml sline - do 100 milijonov bakterij

4. Skupna biomasa mikroorganizmov v debelem črevesu je približno 1,5 kg.

Vrste mikroflore telesa

  1. Rezidenčna mikroflora - stalna, avtohtona, avtohtona
  2. Prehodna - nestalna, alohtonična

Funkcija mikroflore

  1. Kolonizacijska odpornost je normalna mikroflora, ki preprečuje kolonizacijo biotopov telesa s strani neznancev patogeni mikroorganizmi.
  2. Prebava in razstrupljanje eksogenih substratov in metabolitov
  3. Imunizacija telesa
  4. Sinteza vitaminov, aminokislin, beljakovin
  5. Sodelovanje pri izmenjavi žolčnih kislin, sečne kisline, lipidov, ogljikovih hidratov, steroidov
  6. Antikarcinogeni učinek

Negativna vloga mikroflore

  1. Pogojno patogeni predstavniki normalne mikroflore so lahko vir endogene okužbe. Običajno ti mikroorganizmi ne povzročajo težav in z oslabljenim imunskim sistemom, kot je stafilakok - lahko povzroči gnojno okužbo. E. coli - v črevesju, in če se izkaže v mehurju - cistitis, in če pride v rano - gnojna okužba.
  1. Pod vplivom mikroflore se lahko poveča izločanje histamina - alergijska stanja
  1. Normoflora je skladišče in vir plazmidov za protimikrobno odpornost.

Glavni biotopi telesa -

  1. Naseljena habitata - v teh biotopih bakterije živijo, množijo se in opravljajo določene funkcije.
  2. Sterilni biotopi - bakterije so običajno odsotne v teh biotopih, izolacija bakterij iz njih ima diagnostično vrednost.

Naseljeni biotopi -

  1. Kožo
  2. Airways
  3. GIT
  4. Zunanje genitalije, sečnica
  5. Zunanji slušni kanal
  6. Konjunktiva

Sterilni biotopi - kri, cerebrospinalna tekočina, limfa, peritonealna tekočina, plevralna tekočina, urin v ledvicah, ureterji in mehur, sinovialna tekočina.

Kožna mikroflora - epidermalni in saprofitni stafilokoki., Glivice, podobne kvasu, difterioidi, mikrokoki.

Mikroflora zgornjih dihal - streptokoki, dipteroidi, Neisseria, Staphylococcus.

Oralna votlina - stafilokoki, streptokoki, glivice podobne kvasovkam, bakterije lakto, bacteroide, neisserii, spirohete itd.

Eophagus - običajno ne vsebuje mikroorganizmov.

V želodčnem okolju - izjemno neprijetno - laktobacili, kvas, posamezni stafilokoki in streptokoki

Črevesje - koncentracija mikroorganizmov, njihova sestava vrst in razmerje se razlikuje glede na delce črevesja.

Pri zdravih ljudeh v dvanajstniku število bakterij ne presega 10 do 4 do 10 do 5 kolonij, ki tvorijo kolonije (sočasno) na ml.

Sestava vrst - laktobacili, bifidobakterije, bakterioidi, enetrocoki, glivice, podobne kvasu itd. Pri vnosu hrane se lahko število bakterij znatno poveča, vendar se v kratkem času vrne na prvotno raven.

V zgornjem tankem črevesu je število mikroorganizmov 10 do 4 do 10 do 5 kolonizacijskih enot na ml, v ileumu do 10 do 8. stopnje.

Mehanizmi, ki preprečujejo mikrobno rast v tankem črevesu.

  1. Antibakterijsko delovanje žolča
  2. Črevesna perelstaltika
  3. Izolacija imunoglobulinov
  4. Encimska aktivnost
  5. Sluz, ki vsebuje inhibitorje mikrobne rasti

V primeru kršitve teh mehanizmov se povečuje mikrobno sejanje tankega črevesa, t.j. prekomerno rast bakterij v tankem črevesu.

V debelem črevesu pri zdravi osebi je število mikroorganizmov od 10 do 11 do 10 do 12 ko.e na leto Anaerobne vrste bakterij prevladujejo - 90-95% celotne sestave. To so bifidobakterije, bacteroide, bakterije laktoze, veylonella, peptostreptokokki, klostridije.

Približno 5-10% - fakultativni anaerobi - in aerobi - E. coli, enterobakterije negativne laktoze, enterokoki, stafilokoki, glivice podobne kvasu.

Vrste črevesne mikroflore

  1. Pristenochnaya - konstanta v sestavi, opravlja funkcijo kolonizacijskega upora
  2. Razsvetljenje - manj stalna v sestavi, opravlja encimske in imunizacijske funkcije.

Bifidobaktrija so najpomembnejši predstavniki obveznih bakterij v črevesju. To so anaerobi, ki ne tvorijo spore, so gram-pozitivne palice, konci so razcepljeni in imajo lahko sferične otekline. Večina bifidobakterij se nahaja v debelem črevesu, saj je njegova glavna stena in svetlobna mikroflora. Vsebnost bifidobakterij pri odraslih je v 10. do 10. letu 10. v 10. stoletju. na mesto

Laktobacili so še en predstavnik obvezne mikroflore prebavil in je laktobacil. To so gram pozitivne palice, z izrazitim polimorfizmom, razporejenim v verige ali eno za drugo, ne tvorijo spore. Lactoflora najdemo v mleku ljudi in živali. Lactobacillus (laktobacili). Vsebina v debelem črevesu je 10 v 6. - 10 v 8. kil. na mesto

Reprezentativna obvezna mikroflora črevesja je escherichia (Escherichia collie) - E. coli. Vsebnost črevesnih paličic je v sedmem - 10 - ih v osmih stopnjah so 10. na mesto

Eobioz - mikroflora - normalna flora. Biološko ravnovesje normalne flore zlahka motijo ​​eksogeni in endogeni naravni dejavniki.

Dysbacteriosis - spremembe v kvalitativni in kvantitativni sestavi mikroflore in njenih običajnih habitatov.

Črevesna disbakterioza je klinični in laboratorijski sindrom, ki je povezan s spremembami v kvalitativni in / ali kvantitativni sestavi črevesne mikroflore, s posledičnim nastankom presnovnih in imunoloških motenj z možnim razvojem prebavnih motenj.

Dejavniki, ki prispevajo k razvoju črevesne disbioze

  1. Bolezen prebavnega trakta
  2. Post
  3. Antimikrobna kemoterapija
  4. Stres
  5. Alergijske in avtoimunske bolezni
  6. Radioterapija
  7. Izpostavljenost ionizirajočemu sevanju

Najbolj značilne klinične manifestacije

  1. Kršitev stol - driska, zaprtje
  2. Bolečine v trebuhu, meteorizem, napihnjenost
  3. Slabost in bruhanje
  4. Pogosti simptomi - utrujenost, šibkost, glavobol, motnje spanja, hipovitaminoza.

Glede na stopnjo odškodnine -

  1. Kompenzirana disbioza - klinične manifestacije so odsotne, vendar so bakteriološke preiskave kršitve.
  2. Subkompenzirana disbakterioza - manjše, zmerne grafične aplikacije.
  3. Dekompenzirana - ko so klinične manifestacije najbolj izrazite.

Razvrstitev po vrstah ali skupinah organizmov. T

  1. Presežek stafilokokov - stafilokokna disbakterioza
  2. Disbakterioza, ki jo povzročajo pogojno patogene enterobakterije, glivice podobne kvasovkam, povezava pogojno patogenih mikroorganizmov itd.

Dysbacteriosis - koncept bakteriološkega, kliničnega in laboratorijskega sindroma, ni bolezen. Disbakterioza ima glavni vzrok.

Diagnoza motenj mikroflore

  1. Klinična in laboratorijska diagnoza ter ugotavljanje vzrokov za kršitev
  2. Mikrobiološka diagnoza z določitvijo vrste in stopnje kvalitativnih in kvantitativnih motenj v sestavi mikroflore.
  3. Študija imunskega statusa.

Mikrobiološka diagnoza. Kršitev mikroflore telesa.

Predhodna faza - mikroskopski pregled iztrebkov - razmaz in barvanje z gramom

Bakteriološke ali kulturne raziskave. Ta metoda se uporablja že več let. Del iztrebkov, suspendiran v pufrski raztopini. Pripravite razredèitev od 10 do 1 do 10 stopinj. Setev opravimo na hranilnem mediju. Izračunamo gojene mikroorganizme s kulturnimi, morfološkimi, tinktorskimi, biokemičnimi in drugimi lastnostmi ter kazalniki mikroflore, CFU / g blata.

Hranilni mediji -

Sreda Blaurokka - za izolacijo bifidobakterij

MPC agar za Lacto bakterije

Sreda Endo, Ploskireva, Levin - za izolacijo E. coli in oportunističnih enterobakterij.

Sreda Wilson - Blair - anaerobi, ki tvorijo spore - Clostridium

Sreda Saburo - kvasovke gobe - rod Candida

Blood MPA - hemolitični mikroorganizmi

Načela korekcije motenj sestave mikroflore so nespecifični - režim, prehrana, dekontaminacija biotopov telesa, patogenih in pogojno patogenih mikroorganizmov.

Probiotiki in Prebiotiki

- odpravljanje motenj imunosti.

Probiotiki, eubiotiki - so zdravila, ki vključujejo žive mikroorganizme, ki imajo normalizacijski učinek na sestavo in biološko aktivnost mikroflore prebavnega trakta.

Zahteve za probiotike.

  1. Skladnost z normalno človeško mikrofloro
  2. Visoka sposobnost preživetja in biološka aktivnost
  3. Antagonizem proti patogeni in pogojno patogeni mikroflori
  4. Odpornost na fizikalne in kemijske dejavnike
  5. Odpornost na antibiotike
  6. Prisotnost simbiotičnih sevov v napravi

Razvrstitev probiotikov

  1. Klasična monokomponenta - bifidumbakterin, kolibakterin, laktobakterin
  2. Polycomponent - bifikol, atsilakt, lineks
  3. Samolepilni antagonisti - baktisubtil, sporobakterin, eubicor, enterol
  4. Kombinirano - bifiform
  5. Probiotiki, ki vsebujejo rekombinantne seve
  6. Prebiotiki - hilak forte, laktuloza, galakto in fruktooligosaharidi
  7. Sinbiotiki - Acipol, Normoflorin

Prebiotiki so pripravki, ki ustvarjajo ugodne pogoje za obstoj normalne mikroflore.

Sinbiotiki so zdravila, ki vsebujejo racionalno kombinacijo probiotikov in prebiotikov.

Pripravki bakteriofagov - specifičnost delovanja na določene mikroorganizme.

Abdominalna votlina in parietalna mikrobiota pri sindromu razdražljivega črevesa

Prispevek obravnava pojme normalne mikroflore prebavil in njegovih funkcij, obravnava značilnosti votline in parietalne mikrobiotope ter opredeljuje sindrom razdražljivega črevesja (IBS) in njegove klinične oblike. Predstavljeni so rezultati študije rektalne mikroflore rektuma po metodi polimerazne verižne reakcije pri zdravih posameznikih in bolnikih z IBS. Opredeljene statistično pomembne razlike. Predstavljena je primerjalna analiza sestave mikroflore rektalne sluznice in blata pri bolnikih z IBS z zaprtjem in drisko.

Študije o sestavi mikrobiocenoze prebavnega trakta (GIT) osebe so se začele pred več kot tremi stoletji, ko je leta 1681 nizozemski raziskovalec Anthony Van Leeuwenhoek prvič poročal o svojih opažanjih o bakterijah in drugih mikroorganizmih, ki jih najdemo v človeških iztrebkih. vrste bakterij v prebavnem traktu. Trenutno je zelo razširjeno zanimanje za črevesno mikrofloro, njen vpliv na zdravje ljudi in bolezni. Razvoj novih molekularnih genetskih tehnologij, ki omogočajo identifikacijo številnih vrst bakterij, ki niso primerne za gojenje, je služil kot sprožilec poglobljene študije človeške mikrobiote. Pojavila so se nova dejstva, ki kažejo, da je črevesna biocenoza povezana z boleznimi ne le prebavnega trakta, temveč tudi s srčno-žilnim sistemom, debelostjo, alergijskimi in avtoimunskimi boleznimi [1].

Za preučitev stanja mikrobiocenoze in ugotovitev morebitnih odstopanj od normalne sestave mikroflore prebavil so opredelili s konceptom normalne mikroflore. Normalna mikroflora je kvalitativno in kvantitativno razmerje v posameznih organih in sistemih različnih populacij mikroorganizmov, ki ohranjajo biokemično, presnovno in imunsko ravnovesje makroorganizma, ki je potreben za ohranjanje zdravja ljudi [2]. Da bi omenili normalno mikrofloro višjih organizmov, je T. Rosebury v svoji monografiji »Mikroorganizmi domorodni človeku«, ki je izšla že leta 1962 v New Yorku, predlagala ime »microbiota«, ki se najpogosteje uporablja v sodobni literaturi. Pri opisovanju mikrobiote se pogosto uporablja izraz "biotop". Pod biotopom se običajno razume kot ploskev sluznice, kože ali organa makroorganizma z enako vrsto pogojev obstoja mikroorganizmov [3]. S sodobnega vidika se normalna človeška mikroflora obravnava kot filogenetsko oblikovan sistem večkratnih mikrobiocenoz, za katere je značilna specifična vrstna sestava in zaseda določen biotop v človeškem telesu [4]. Skupna masa vseh mikroorganizmov, ki kolonizirajo človeške organe in tkiva, je 3-5 kg.

Mikroflora prebavil je najbolj reprezentativna, njena masa pri odraslem je večja od 2,5 kg, število - 1014 CFU [5]. Ob upoštevanju novih podatkov, pridobljenih pri proučevanju mikroflore različnih biotopov gastrointestinalnega trakta z uporabo molekularno genetskih metod, celotni genom bakterij prebavil vsebuje 600 tisoč genov, kar je 24-krat večji od človeškega genoma. Večina predlaganih novih filotipov mikroorganizmov so predstavniki rodov Firmicutes in Bacteroides. Skupno število vrst se približuje 1500 in zahteva dodatna pojasnila [6].

Kavitacija prebavnega trakta skozi sistem sfinkterja komunicira z zunanjim okoljem sveta okoli nas in hkrati skozi črevesno steno - z notranjim okoljem telesa. Zaradi tega je v gastrointestinalnem traktu nastalo intrinzično okolje, ki ga lahko razdelimo na dve ločeni niši: himus in sluznico. V mikroekološkem smislu je lahko gastrointestinalni biotop deljen na parangale (ustna votlina, želodec, črevesni odseki) in mikrobiotopi (abdominalni in parietalni).

Mikrobiotope votline v gastrointestinalnem traktu je heterogeno, njegove lastnosti so določene s sestavo in kakovostjo vsebine enega ali drugega sloja. Parangali imajo svoje anatomske in funkcionalne lastnosti, zato se njihova vsebina razlikuje po sestavi snovi, konsistenci, pH, hitrosti gibanja in drugih lastnostih. Te lastnosti določajo kvalitativno in kvantitativno sestavo mikrobnih votlin, ki so jim prilagojene. Abdominalna mikroflora je bolj spremenljiva kot sluznica in je občutljiva na različne eksogene vplive.

V zvezi s tem je za oblikovanje optimalnih kvantitativnih in kvalitativnih parametrov abdominalne mikroflore zelo pomembna oskrba neprebavljivih prehranskih vlaken, ki delujejo kot hranilni substrat in matrica, na kateri so predstavniki obvezne mikroflore fiksni in tvorijo kolonije.

Temeljna mikrobiotope je najpomembnejša struktura, ki omejuje notranje okolje telesa od zunanjega. Predstavljeni so s prekrivki sluznice (sluzni gel, mucin gel), glikokaliksi, ki se nahajajo nad apikalnimi membranami enterocitov (kolonociti) in površino same apikalne membrane. Parietalna mikroflora črevesa kolonizira sluznico v obliki mikrokolonij, ki tvorijo poseben biološki film, ki sestoji iz mikrobnih teles in eksopolisaharidne matrice. Eksopolisaharidi mikroorganizmov (glikokaliksi) ščitijo mikrobne celice pred različnimi fizikalno-kemijskimi in biološkimi učinki. Tudi črevesna sluznica je zaščitena z biološkim filmom. Med kolonijami mikroorganizmov in črevesno steno obstaja tesna povezanost, ki omogoča, da se združijo v kompleks mikrobnih tkiv [7]. Parietalni mikrobiotope je najbolj zanimiv z vidika bakteriologije, saj se v njem pojavi interakcija z bakterijo, ki je koristna ali škodljiva za ljudi - to, kar imenujemo simbioza. Abdominalna in parietalna mikroflora sta med seboj povezani populaciji, med katerimi je stalna izmenjava mikroorganizmov, zaradi česar se oblikuje individualna varianta normalne črevesne mikroflore.

Med črevesno eubioticno mikrofloro in glavnimi funkcijami prebavnega trakta obstaja tesna povezanost: črevesna eubiotska mikroflora vpliva na funkcije prebavnega trakta, kar vpliva na eubiozo. V tem razmerju se ohranja strukturna in funkcionalna celovitost sluznice; motorična aktivnost, ki zagotavlja gibanje substrata vzdolž prebavnega trakta; transformacija živilskih polimerov s lipolizo in hidrolizo; transport hranil skozi plast sluznic; uravnavanje prebavnega procesa z uporabo substratnih in nevroendokrinih mehanizmov; zaščita telesa pred agresijo tujih antigenov; ohranjanje eubioze in ohranjanje kvalitativne in kvantitativne konstante populacijske bilance črevesne mikrobiocenoze [8].

Ena od bolezni, ki je, kot dokazujejo številne študije zadnjih let, spremljajo spremembe mikrobiocenoze GIT, je sindrom razdražljivega črevesa (IBS). V skladu s Rimskim soglasjem III o funkcionalnih prebavnih motnjah je IBS funkcionalna bolezen črevesja, pri kateri je bolečina v trebuhu ali bolečina v trebuhu povezana z iztrebljanjem, spremembami v pogostnosti in naravi blata. Odvisno od simptomov je IBS razdeljen v tri oblike: s pretežno drisko, s prevlado zaprtja in mešano, za katero je značilno menjavanje zaprtja in driske [9]. Sposobnost črevesne mikroflore, da proizvaja nevrotransmiterje, ki vplivajo na črevesni sistem in s tem spreminjajo izločanje in gibljivost črevesja, kot tudi prag visceralne občutljivosti, kažejo na pomembnost disbiotičnih sprememb v patogenezi CPK [10, 11].

Znano je, da se sestava mikroflore fekalij razlikuje od sestave črevesne sluznice. Toda kakšna je narava teh razlik in ali je klinična oblika bolezni pomembna, kar je značilno za moteno delovanje črevesnega motorja, ni znano. Glede na zgoraj navedeno se nam je zdelo pomembno in zanimivo preučiti sestavo parietalne mikroflore rektuma pri zdravih posameznikih in bolnikih z IBS; izvedbo primerjalne ocene sestave mikroflore v votlini in parietalne mikrobiotope rektuma bolnikov z IBS z uporabo verižne reakcije polimeraze v realnem času (PCR-RV).

Material in metode

Za reševanje problemov je bilo izbranih 40 bolnikov z IBS: 20 bolnikov je imelo diagnozo IBS s prevlado driske (IBS-D) in 20 bolnikov s IBS s prevalenco zaprtja (IBS-W). Diagnoza bolezni je temeljila na diagnostičnih merilih, ki jih je razvil rimski konsenz III o funkcionalnih prebavnih motnjah. Moški so predstavljali 62,5%, povprečna starost bolnikov je bila 39,6 ± 8,0 let. Kontrolno skupino (GC) je sestavljalo 14 zdravih prostovoljcev normalne prehrane, starih od 19 do 50 let (11 moških in 3 ženske). Obvezen pogoj za vključitev v skupino predmetov je bila pisna pisna privolitev vsakega pacienta in zdravega subjekta. Vzorci vzorcev biopsije rektalne sluznice so bili zbrani pri zdravih posameznikih in izbranih bolnikih s fibrosigmoskopijo, vzorci fekalij so bili zbrani pri bolnikih, ki so bili zamrznjeni za nadaljnjo molekularno analizo s PCR-RV.

PCR diagnostika vzorcev, ki smo jih raziskali, je bila izvedena z uporabo ojačevalnika DT96 (NPO DNA-Tehnologiya, Rusija), ki je zagotovil delovanje PCR z avtomatskim zapisovanjem rezultatov v načinu “realnega časa”. Komplet reagenta je vključeval mešanico za PCR pomnoževanje, specifično za vse bakterije (skupna bakterijska masa), specifične zmesi za odkrite mikroorganizme. V eni epruveti z pomnožitveno mešanico smo dodali notranji kontrolni vzorec, da bi ocenili učinkovitost postopka PCR. Ena od cevi je vsebovala mešanico za ojačanje humane genomske DNA, ki je bila zasnovana za oceno kontrole jemanja kliničnega materiala.

V preiskovanih vzorcih po metodi PCR-RV so bili določeni naslednji indikatorji: kontrola zajetja materiala (CME), skupna bakterijska masa (MBP), absolutne vrednosti mikroorganizmov, z naknadnim izračunom relativnih kazalnikov. Absolutne vrednosti MBP, CME in diagnosticiranih mikroorganizmov v rezultatih PCR-RV so bile predstavljene v obliki decimalnega logaritma (lg), izračunanega s številom pragovnega cikla, in grobo ustrezala količini želene DNA, izražene v ekvivalentnem genomu v vzorcu (GE / obr). Za bolj objektivno analizo izračunani relativni kvantitativni kazalci mikrobiote odražajo število specifičnih mikroorganizmov glede na skupno bakterijsko maso. Relativni kazalniki so predstavljeni kot razlika decimalnih logaritmov ustrezne skupine mikroorganizmov in skupne bakterijske mase.

V vzorcih je bilo identificiranih 27 skupin bakterij glavnih štirih tipov (Firmicutes, Bacteroidetes, Proteobacteria, Actinobacteria) (tabela 1).

Statistično obdelavo podatkov smo izvajali na osebnem računalniku z licenčnimi računalniškimi programi Microsoft Excel 2007 in SPSS-Statistics 17. Pri analizi porazdelitve kvantitativnih podatkov so določeni osrednji trendni ukrepi - mediana (Me), ukrepi disperzije - interkvartilni razpon v obliki 25 in 75% percentilov. Za izračun pomembnosti razlik v majhnih vzorcih smo uporabili neparametrični Mann-Whitneyjev test. Merilo statistične pomembnosti je bila raven p ≤ 0,05.

Rezultati raziskav in razprava

V prvi fazi dela smo izvedli primerjalno analizo mikroflore rektalne sluznice zdravih prostovoljcev in bolnikov z IBS-D in IBS-W. Najprej je treba omeniti povečanje celotne bakterijske kontaminacije rektalne sluznice v obeh kliničnih oblikah IBS. Razlike v CPK-3 - MBP - 6,0 (5,6; 6,5) lg GE / arr so bile statistično značilne. v primerjavi s kontrolno skupino - MBP - 5,2 (4,0, 5,6) log GE / ar. (p = 0,002).

Pri IBS, ne glede na klinično obliko, je bila ugotovljena visoka vsebnost Faecalibacterium praustnizi v mukozni mikroflori danke v primerjavi z GC: z IBS-G (p = 0,047), IBS-D (p = 0,05). Pri bolnikih z IBS-D v primerjavi z GK je bila koncentracija Eubacterium spp manjša. (p = 0,049) (sl. 1).

Za ugotavljanje povezave med največjo pogostostjo blata na dan z IBS-D in koncentracijo eubakterij v sluznici rektuma je bila izvedena korelacijska analiza teh indikatorjev. Ugotovljeno je bilo, da največje število gibanja črevesja na dan negativno korelira s koncentracijo eubakterij v rektalni sluznici (-0,47; p